108年:藥學三(第2次)
細菌內毒素檢驗法利用 Limulus polyphemus 的amoebocyte lysate 製成之 BET 試劑,其檢測原理是與細菌內毒素結合後會:
A形成 沉澱物
B顏色改變
C形成凝膠
D吸光波長改變
詳細解析
本題觀念:
細菌內毒素試驗(Bacterial Endotoxin Test, BET)是利用鱟(horseshoe crab, Limulus polyphemus)的變形細胞溶解物(Limulus amebocyte lysate, LAL)偵測革蘭氏陰性菌(Gram-negative bacteria)細胞壁的脂多醣(lipopolysaccharide, LPS)內毒素。BET 最傳統也最廣泛使用的方法是凝膠形成法(gel-clot method)。
選項分析
(A) 形成沉澱物 內毒素與 LAL 反應後形成的是具有黏彈性的「凝膠」,而非水不溶性的沉澱物(precipitate)。兩者在物理性質上有明顯差異:凝膠(gel)保持半固態形狀,沉澱則下沉積聚。❌ 非答案
(B) 顏色改變 顏色改變是比色法(chromogenic LAL method)的原理——使用合成基質(如 Boc-Leu-Gly-Arg-pNA),活化的凝血酶切割基質後釋出黃色顯色物。但題目描述的是基本 BET 試劑(LAL)的「檢測原理」,指的是最基本的凝膠形成法,而非衍生的比色法。❌ 非答案
(C) 形成凝膠 凝膠形成法(gel-clot method)是 BET 的基礎與最常用方法。內毒素(LPS)與 LAL 接觸後,啟動一系列絲胺酸蛋白酶(
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