108年:藥學二(第1次)
下列液相層析-質譜( LC-MS )分析的離⼦化法中,何者最適⽤於蛋⽩質的測定?
A粒⼦束( particle beam )
B熱噴灑( thermospray )
C⾼速原⼦撞擊( FAB )
D電灑法( ESI )
詳細解析
本題觀念:
液相層析-質譜法(LC-MS)中,離子化方法的選擇對大分子(如蛋白質)的分析至關重要。蛋白質分子量大(數萬至數百萬 Da)、極性高、熱不穩定,需要能在「軟式」條件下產生穩定多電荷離子的離子化方式。
選項分析
(A) 粒子束(particle beam) — 不適合蛋白質。粒子束介面法主要讓分析物脫溶劑後以粒子形式引入 EI 或 CI 等硬式離子源,適用於揮發性、小分子(MW < 1000 Da)的非極性至中等極性化合物,對蛋白質等大分子效果極差。
(B) 熱噴灑(thermospray) — 不適合蛋白質。熱噴灑法利用加熱霧化,適用於中等極性的小分子(MW 通常 < 1500 Da),熱穩定性較差的大分子(如蛋白質)在高溫下容易變性分解,且所能分析的質量範圍不足以涵蓋蛋白質。
(C) 高速原子撞擊(Fast Atom Bombardment, FAB) — 部分適用但有限制。FAB 屬於軟式離子化,可分析極性、熱不穩定的大分子,但分析範圍通常僅達數千 Da(數個 kDa),對高分子量蛋白質(如抗體,>100 kDa)仍不足。此外 FAB 有基質化學雜訊問題,與 LC 的介接也不如 ESI 便利。
(D) 電灑法(Electrospray Ionization, ESI) — 最適合蛋白質。ESI 可產生多
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