使用 ODS 管柱分析 4種蛋白質（ I-IV ），其親脂性大小為 I＞II ＞III ＞IV ，以一般蛋白質之分析條件進行梯度沖提而得到適當分離，則滯留時間最長者為：

本題觀念：

逆相高效液相層析法（reversed-phase high performance liquid chromatography, RP-HPLC）中，ODS（octadecylsilyl，C18）管柱對蛋白質的滯留行為，以及親脂性（hydrophobicity）與滯留時間的關係。

選項分析

在 RP-HPLC 中，ODS 管柱的固定相為非極性的 C18 烷基鏈，流動相為含水有機溶劑系統。分析物與固定相之間的非共價疏水性交互作用（hydrophobic interaction）是決定滯留時間的主要因素：親脂性越強，與 C18 固定相的疏水性鍵結越強，滯留時間越長。

題目給定 4 種蛋白質的親脂性大小為：I > II > III > IV

(A) I 親脂性最強（I > II > III > IV），在 ODS 管柱上與固定相的疏水性交互作用最強，梯度沖提（gradient elution）時需要最高的有機溶劑比例才能洗脫，因此滯留時間最長。此選項正確。

(B) II 親脂性次強，滯留時間第二長，非最長。

(C) III 親脂性次弱，滯留時間第二短。

(D) IV 親脂性最弱，與 C18 固定相交互作用最弱，最先被洗脫，滯留時間最短。

答案解析

正確答案為 (A) I。

RP

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