107年:藥學二(第1次)
以高效液相層析法分析生物檢體中的乳酸( CH₃CH(OH)COOH )濃度時,下列何種化合物為最適當之內部標準品?
A丙醛(C₂H₅CHO )
B丙酸(C₂H₅COOH )
C丁酸(C₃H₇COOH )
D甲基乙二醛( CH₃COCHO )
詳細解析
本題觀念:
高效液相層析法(high performance liquid chromatography, HPLC)內部標準品(internal standard, IS)的選擇原則
選項分析
分析物:乳酸(lactic acid),分子量 90,含羥基與羧基的 α-羥基酸。
內部標準品選擇的三大核心標準:
- 結構與分析物相似(相近官能基、相近極性/logD、相近 pKa)
- 分析物樣品中天然不存在
- 在層析條件下與分析物有不同的滯留時間(可分離,不重疊)
(A) 丙醛(propanal,) 含醛基(–CHO),無羧基與羥基,官能基性質與乳酸差異大,極性不同,化學行為在生物樣品前處理中差異明顯,且揮發性高,不適合作為 IS。
(B) 丙酸(propionic acid,) 含羧基(–COOH),為飽和短鏈一元有機酸,與乳酸(α-羥基酸)同為短鏈有機酸,主官能基皆含 –COOH,極性與樣品前處理回收率相近;在 HPLC 層析上滯留時間可與乳酸明顯區分(無 –OH 基,保留時間略有差異)。最符合內部標準品條件。 → 正確答案
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