108年:(醫檢)檢驗(2)

使用光學顯微鏡以油鏡觀察檢體時,應該要注意下列何者?

A將聚光鏡調低位置,以改善解析力
B最好採用紅色濾光片,以增加明暗對比
C使用完畢後,不能有浸油在物鏡上
D光圈不可調到最大

詳細解析

本題觀念:

油鏡(oil immersion objective)的正確使用、保養與相關光學原理。油鏡是數值孔徑(numerical aperture, NA)最高的物鏡,使用完畢後必須清潔鏡面上的浸油,否則油脂硬化後會損壞鏡片光學品質。

選項分析

(A) 將聚光鏡調低位置,以改善解析力
此為錯誤操作。使用油鏡時應將聚光鏡升至最高位置(接近玻片底部),使聚光鏡 NA 最大化,以充分配合油鏡的高 NA,才能達到最佳解析度。降低聚光鏡反而會減少數值孔徑,降低解析力。

(B) 最好採用紅色濾光片,以增加明暗對比
錯誤。提升解析度應使用藍色(短波長)濾光片,因為解析度與波長成反比(d=0.61λNA\text{d} = \frac{0.61\lambda}{\text{NA}}),波長越短解析度越高。紅色濾光片波長較長,反而降低解析度。若目的是增加明暗對比,需視染色方法而定,並非一律用紅色濾光片。

(C) 使用完畢後,不能有浸油在物鏡上
本選項正確。 油鏡使用完畢後,必須立即用鏡頭紙(lens paper)沾適當鏡頭清潔液(如乙醚/酒精混合液)從中心向外螺旋擦拭,徹底清除鏡面殘油。若浸油乾燥硬化:

  • 難以清除且容易刮傷鏡片
  • 殘油黏附灰塵,影響光學品質(產生陰影或霧化)
  • 長期殘留可腐蝕鏡片表面塗層

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