108年:(醫檢)檢驗(2)
檢測 HLA 等位基因時,因 HLA 等位基因數目眾多,常出現混型難辨( ambiguity ),下列何種檢驗法較容易解決此問題?
A變性高效能液相層析法
B特異性引子聚合 酶連鎖反應
C原位雜交螢光法( Fluorescence in situ hybridization, FISH )
DDNA 桑格定序法
詳細解析
本題觀念:
人類白血球抗原(human leukocyte antigen, HLA)等位基因分型中,混型難辨(ambiguity)問題及各種檢驗方法的解析度比較。
選項分析
(A) 變性高效能液相層析法(denaturing high-performance liquid chromatography, DHPLC) ❌ DHPLC 可偵測 DNA 序列變異,主要作為突變篩查工具,並非高解析度 HLA 分型的主流方法。對於 HLA 等位基因眾多所造成的混型難辨問題,解析能力有限,且無法確定相位(phase)。
(B) 特異性引子聚合酶連鎖反應(sequence-specific primer PCR, SSP-PCR) ❌ SSP-PCR(又稱 PCR-SSP)是利用針對特定等位基因設計的引子組,陽性/陰性結果組合判斷分型。雖然可用於快速分型,但在等位基因數目龐大(HLA-A、B、C、DRB1 各有數千至數百個等位基因)的情況下,引子組的覆蓋範圍有限,且仍可能遭遇混型。SSP-PCR 通常用於確認特定疑似分型,而非解決大範圍混型難辨。
(C) 原位雜交螢光法(fluorescence in situ hybridization, FISH) ❌ FISH 是在細胞染色體層次偵測基因位置或拷貝數的技術,通常解析度在基因組定位或
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