欲分析培養的細胞群中分泌特定細胞激素（ cytokine ）之細胞時，可使用下列何種方法？

本題觀念：

本題考察免疫學實驗方法的原理與應用。題目情境為「偵測培養細胞群中分泌特定細胞激素（cytokine）的細胞」，關鍵在於「單細胞層級的偵測（single-cell detection）」，這正是 ELISPOT assay 的核心優勢。

選項分析

(A) ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，酵素連結免疫吸附法） ELISA 偵測細胞培養上清液（supernatant）中細胞激素的總濃度（以 pg/mL 表示），反映所有細胞的總分泌量，無法辨別是哪些細胞在分泌，亦無法定量「分泌細胞的數量」。不符合題目要求。

(B) ELISPOT assay（Enzyme-Linked ImmunoSpot Assay，酵素連結免疫斑點分析） ELISPOT 是 ELISA 的衍生技術，可在單細胞層級偵測細胞激素分泌細胞。其原理為：

• 培養盤底部塗有抗細胞激素抗體（capture antibody）
• 細胞在盤中活化分泌細胞激素，細胞激素被周圍膜立即捕捉
• 移除細胞後加入偵測抗體，每個分泌細胞對應一個可見「斑點（spot）」
• 計數斑點即可得知分泌特定細胞激素的細胞數量 靈敏度可達 1/100,000 細胞。完全符合題目要求——正確答案。

**(C) Cytotoxic

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