108年:(醫檢)血液(1)
以流式細胞儀( flow cytometry )與⾃動化全⾎細胞計數( complete blood count, CBC )儀進⾏⽩⾎球檢驗時,下列何者最正確?
A⼆者皆須先將紅⾎球溶解,並進⾏螢光抗體標⽰
B⾃動化全⾎細胞計數上機前不需溶解紅⾎球,也可不需使⽤螢光抗體標⽰
C流式細胞儀上機前需先離⼼將紅⾎球移除
D流式細胞儀使⽤後樣本,可以直接再⽤⾃動化全⾎細胞計數分析,反之亦然
詳細解析
本題觀念:
流式細胞儀(flow cytometry, FCM)與自動化全血細胞計數(complete blood count, CBC)儀器雖都能進行白血球(WBC)分析,但其樣本前處理方式、技術原理和所需試劑截然不同。本題考核兩種方法的關鍵操作差異。
選項分析
(A) 二者皆須先將紅血球溶解,並進行螢光抗體標示 此選項有兩個錯誤:
- 自動化 CBC 儀器不需要螢光抗體標示,它使用電阻抗(electrical impedance)或光散射(light scatter)原理進行細胞分類
- 雖然部分 CBC 儀器的 WBC 計數管道確實需要溶解紅血球,但方法上與流式細胞儀完全不同,且不涉及螢光抗體 此選項錯誤。
(B) 自動化全血細胞計數上機前不需溶解紅血球,也可不需使用螢光抗體標示 自動化 CBC 儀器的 WBC 分析管道通常使用溶血劑(lysing agent)在儀器內部自動溶解紅血球,無需操作者手動前處理;且 CBC 分析原理基於電阻抗、射頻(radiofrequency)和多角度光散射,完全不需要螢光抗體標示。這與流式細胞儀的人工手動加入螢光標記抗體的程序形成對比。因此,「上機前不需溶解紅血球、也不需螢光抗體標示」對 CBC 儀器而言是正確的(溶血在儀器內部自動完成,非上機前手動步驟
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