以核酸增幅法檢測病原菌，下列何種⽅法係採⽤恆 溫（isothermal ）進⾏？

本題觀念：

核酸增幅（核酸擴增）法的溫度需求分類：恆溫（isothermal）vs. 需熱循環（thermal cycling）

核酸擴增技術可依據反應是否需要溫度循環分為兩大類：

• 需要熱循環（thermal cycling）：如 PCR 及其衍生法（nested PCR、RT-PCR 等）、LCR
• 恆溫擴增（isothermal amplification）：如 SDA、LAMP、NASBA、RCA、HDA、RPA 等

選項分析

(A) Ligase chain reaction（LCR，連接酶連鎖反應） LCR 雖不是 PCR，但同樣需要熱循環：每個循環包含高溫變性（94°C）→ 降溫退火（60–65°C）→ 連接酶接合探針，再升溫變性進入下一循環。LCR 使用耐熱 DNA 連接酶（thermostable Taq ligase），不需要延伸步驟，但不是恆溫反應。錯誤。

(B) Strand displacement amplification（SDA，鏈置換擴增） SDA 是真正的恆溫擴增技術。其原理結合：

1. 限制酶（如 HincII）在引子/模板雙股 DNA 上的切刻（nicking）作用
2. 缺乏 5'→3' 外切酶活性的 DNA 聚合酶（如 Klenow fragmen

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