⽬前應⽤於細菌分⼦診斷法中，下列何者不需運⽤ PCR 技術？

本題觀念：

細菌分子診斷法中各技術的 PCR 依賴性

細菌分子診斷方法眾多，大部分需要先進行 PCR 擴增目標 DNA 片段後，再做後續分析。然而，少數傳統分子分型技術直接作用於完整基因組 DNA，不需 PCR 介入。

選項分析

(A) Single strand conformation polymorphism（SSCP，單股構形多型性） SSCP 的標準流程：先以 PCR 擴增目標基因片段（通常為 16S rRNA 基因的可變區），再將 PCR 產物加熱變性形成單股 DNA，電泳時單股 DNA 因序列不同而折疊成不同立體構形，導致電泳移動速率不同。需要 PCR。

(B) Restriction fragment length polymorphism（RFLP，限制片段長度多型性） 雖然最早期的 RFLP 可直接對基因組 DNA 進行限制酶切割再 Southern blot，但在細菌分子診斷的現代應用中（如 PCR-RFLP），通常先以 **PCR 擴增特定基因（16S rRNA、ITS 等）**後再進行限制酶切割分析，提高靈敏度與效率。現代診斷應用通常需要 PCR。

(C) Internal transcribed spacer（ITS）sequencing（ITS 定序） ITS 是位於 1

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