利⽤分⼦⼤⼩不同來分離蛋⽩質，使⽤下列何種⽅法較佳？

本題觀念：

蛋白質純化有多種層析（chromatography）技術，各自依據不同的物理化學性質進行分離。本題考核各層析法的分離原理，重點在於哪種方法是依**分子大小（molecular size）**進行分離。

選項分析

(A) 親和性色層分析法（Affinity chromatography）：依據蛋白質與固定配體（ligand）之間特異性的生物交互作用進行分離，例如酶與受質類似物、抗體與抗原的結合。分離依據是生物親和性（bioaffinity），而非分子大小。

(B) 濾紙色層分析法（Paper chromatography）：利用樣品在紙張（固定相）和移動溶劑（移動相）之間的分配（partition）進行分離，主要應用於小分子胺基酸或小分子量物質，不適合大分子蛋白質的分子量分離。

(C) 離子交換層析法（Ion-exchange chromatography）：依據蛋白質的**表面電荷（net charge）**與交換樹脂之間的靜電交互作用進行分離，分離依據是電荷，而非分子大小。

(D) 凝膠過濾層析法（Gel filtration chromatography） ✅：又稱尺寸排阻層析法（size exclusion chromatography, SEC）。固定相由含有特定孔徑的凝膠珠（porous bead

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