108年:(醫檢)生化(1)
利⽤ Nephelometric method 定量蛋⽩質時,下列敘述何者錯誤?
A偵測抗原抗體反應後產⽣的螢光強度
B可以使⽤ end point 或kinetic ⽅式偵測
C若抗原過量,可能導致偵測結果偏低
D會受到脂⾎( Lipemia )的影響
詳細解析
本題觀念:
本題為反向題(問「何者錯誤」),考核散射比濁法(nephelometric method)定量蛋白質的基本原理。Nephelometry(散射比濁法)與 Turbidimetry(吸收比濁法)同為利用光學偵測抗原抗體反應的免疫分析方法,但兩者的偵測原理不同。
選項分析
(A) 偵測抗原抗體反應後產生的螢光強度 ❌(錯誤 = 本題答案):Nephelometry 不是偵測螢光(fluorescence)!其原理是偵測抗原抗體複合物(immune complex)形成後所造成的**散射光(scattered light)**強度,偵測角度通常為入射光前方的某一角度(如 70°~90°)。螢光偵測是螢光免疫分析法(fluorescence immunoassay)的原理,與 nephelometry 不同。
(B) 可以使用 end point 或 kinetic 方式偵測 ✅(正確):Nephelometry 可依偵測時機分為兩種模式:
- Endpoint(終點法):在反應達到平衡後,測量最終散射光強度
- Kinetic(動力學法):連續追蹤散射光強度隨時間的變化率,速度更快,適合高通量檢驗
(C) 若抗原過量,可能導致偵測結果偏低 ✅(正確):此為免疫分析中著名的**帶現象(hook eff
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