108年:(醫檢)生化(1)

以雙縮 脲法( Biuret method )測定蛋⽩質時,所產⽣的產物顏⾊為:

A紅⾊
B黃⾊
C綠⾊
D紫⾊

詳細解析

本題觀念:

雙縮脲法(Biuret method)是臨床化學中最常用的血清總蛋白定量方法之一。其原理是在鹼性環境下,蛋白質中的肽鍵(peptide bond)氮原子與銅離子(Cu2+\text{Cu}^{2+})形成有色螯合錯合物(chelate complex),藉此定量蛋白質濃度。

選項分析

(A) 紅色 錯誤。Biuret 反應不會產生紅色。部分酚類試劑(如 Folin-Ciocalteu 試劑)在 Lowry 法中會產生藍色,但非 Biuret 法的顏色。

(B) 黃色 錯誤。黃色不是 Biuret 反應的產物顏色。某些蛋白質試驗(如黃色硝基苯丙胺酸反應)才呈黃色。

(C) 綠色 錯誤。Biuret 試劑本身因含 Cu2+\text{Cu}^{2+} 而呈藍色,與蛋白質反應後顏色會往紫色方向移動,而非綠色。

(D) 紫色 正確。在鹼性條件(NaOH 或 KOH)下,Biuret 試劑中的 Cu2+\text{Cu}^{2+}(來自 CuSO4\text{CuSO}_4)與蛋白質肽鍵上的氮原子形成螯合錯合物,呈現紫色(violet-purple)。此複合物最大吸收波長約為 540 nm,吸光度與蛋白質濃度成正比(符合 Beer-Lambert 定律)。

答案解析

Biuret 試劑的組成:CuSO4\text{CuSO}_4

...(解析預覽)...