108年:(醫檢)生化(1)
以雙縮 脲法( Biuret method )測定蛋⽩質時,所產⽣的產物顏⾊為:
A紅⾊
B黃⾊
C綠⾊
D紫⾊
詳細解析
本題觀念:
雙縮脲法(Biuret method)是臨床化學中最常用的血清總蛋白定量方法之一。其原理是在鹼性環境下,蛋白質中的肽鍵(peptide bond)氮原子與銅離子()形成有色螯合錯合物(chelate complex),藉此定量蛋白質濃度。
選項分析
(A) 紅色 錯誤。Biuret 反應不會產生紅色。部分酚類試劑(如 Folin-Ciocalteu 試劑)在 Lowry 法中會產生藍色,但非 Biuret 法的顏色。
(B) 黃色 錯誤。黃色不是 Biuret 反應的產物顏色。某些蛋白質試驗(如黃色硝基苯丙胺酸反應)才呈黃色。
(C) 綠色 錯誤。Biuret 試劑本身因含 而呈藍色,與蛋白質反應後顏色會往紫色方向移動,而非綠色。
(D) 紫色 正確。在鹼性條件(NaOH 或 KOH)下,Biuret 試劑中的 (來自 )與蛋白質肽鍵上的氮原子形成螯合錯合物,呈現紫色(violet-purple)。此複合物最大吸收波長約為 540 nm,吸光度與蛋白質濃度成正比(符合 Beer-Lambert 定律)。
答案解析
Biuret 試劑的組成:(
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