108年:(醫檢)生化(1)
下列有關以電泳法來分析⾎ 清中肌酸激 酶(CK )同功 酶的敘述,何者正確?
A檢體需室溫保存,不可冷藏或冷凍
B在pH 8.6 之電泳條件下, CK-3 向陽極移動之速度最快
C電泳結束,加入反應試劑後,可以可⾒光或螢光進⾏偵測
D電泳結束後,與電泳膠反應之試劑含有 NADH 和乳酸脫氫 酶
詳細解析
本題觀念:
肌酸激酶(creatine kinase, CK)同功酶電泳分析是臨床化學的重要技術。CK 由 M(muscle)與 B(brain)兩種次單元組成,形成三種同功酶:CK-MM(CK-3)、CK-MB(CK-2)與 CK-BB(CK-1)。電泳分離後,需利用耦合酵素反應顯色,才能偵測各條帶的活性。
選項分析
(A) 檢體需室溫保存,不可冷藏或冷凍 此敘述錯誤。CK 對熱不穩定,CK-BB 在室溫下衰減最快,CK-MB 次之,CK-MM 較穩定。正確的保存方式為冷藏(4°C 可保存 24 小時)甚至冷凍(−20°C 可保存更久)。室溫保存反而會加速酵素活性喪失,尤其是 CK-BB。
(B) 在 pH 8.6 之電泳條件下,CK-3 向陽極移動之速度最快 此敘述錯誤。CK-3 即 CK-MM(由兩個帶正電 M 次單元組成),在 pH 8.6 鹼性電泳條件下淨電荷最接近中性,幾乎停留在原點或僅微向陽極移動。向陽極移動最快的是 CK-1(CK-BB),因為 B 次單元帶有較多負電荷;CK-2(CK-MB)居中。電泳遷移速率:CK-BB > CK-MB > CK-MM。
(C) 電泳結束,加入反應試劑後,可以可見光或螢光進行偵測 此敘述正確。CK 電泳後的顯色系統採用耦合酵素反應:CK 催化 creatine
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