108年:(醫檢)生化(1)
以動⼒學分析法進⾏肌酸激 酶(Creatine kinase )常規檢驗分析時,下列何者錯誤?
A必須使⽤恆溫裝置
B酵素活性與反應速率成正比
C必須連續定時多點測量
D必須採⽤酵素標準液進⾏校正
詳細解析
本題觀念:
動力學分析法(kinetic assay / rate assay)的基本原理,及其與終點法(endpoint assay)的差異,特別針對肌酸激酶(creatine kinase, CK)常規分析的操作要求。
選項分析
(A) 必須使用恆溫裝置 ✅ 正確陳述 酵素活性對溫度高度敏感,溫度每升高 1°C 約影響酵素活性 10%(依溫度係數 Q₁₀ ≈ 2)。動力學分析過程中,若溫度波動會導致反應速率改變,使量測值不可靠。因此必須維持恆溫(通常為 37°C 或 30°C)。
(B) 酵素活性與反應速率成正比 ✅ 正確陳述 動力學分析法的核心原理:在受質濃度遠大於酵素濃度的條件下(即底物飽和狀態,),反應速率(v)與酵素量([E])成正比。此線性關係是定量酵素活性的基礎。
(C) 必須連續定時多點測量 ✅ 正確陳述 動力學分析需在線性反應期(linear phase)內進行多時間點(通常 2 點以上,或連續分光光度法)的吸光值測量,以確認反應速率確實在線性範圍內。這與終點法(只測量起點和終點)有所不同。現代自動分析儀(如 Roche cobas)確認線性進行多點讀取。
(D) 必須採用酵素標準液進行校正 ❌ 錯誤陳述(本題答案) 動力學分析法不需要酵素
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