107年:(醫檢)檢驗(2)
下列關於轉錄介導的擴增法( Transcription-mediated amplification, TMA )的敘述,何者正確?
A利用溫度的改變來放大與分離核酸
B擴增產物為 DNA
C需要 T7 RNA 聚合 酶(Polymerase )
D反應物移到另一支試管以偵測訊號
詳細解析
本題觀念:
轉錄介導的擴增法(transcription-mediated amplification, TMA)是一種等溫核酸擴增技術(isothermal nucleic acid amplification),不同於 PCR 需要熱循環,TMA 在恆定溫度(約 41–42°C)下進行,使用**逆轉錄酶(reverse transcriptase, RT)**和 **T7 RNA 聚合酶(T7 RNA polymerase)**兩種酵素來擴增目標核酸。
選項分析
(A) 利用溫度的改變來放大與分離核酸 此描述符合的是 PCR(polymerase chain reaction),需要高溫變性(denaturation)、低溫退火(annealing)、延伸(extension)等熱循環。TMA 是等溫反應,不需要溫度改變,故此選項錯誤。
(B) 擴增產物為 DNA TMA 的擴增產物是 RNA 擴增子(RNA amplicons),而非 DNA。這是 TMA 與 PCR 最大的差異之一。RNA 產物在環境中較不穩定,可減少汙染風險(carry-over contamination),故此選項錯誤。
(C) 需要 T7 RNA 聚合酶(Polymerase) ✅ (正確答案) TMA 使用兩種核心酵素
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