107年:(醫檢)檢驗(2)

下列何種分子診斷技術,最適合用來快速分析東南亞型的甲型海洋性貧血帶因者?

AARMS
BGap-PCR
C南方墨點法
DDNA 定序

詳細解析

本題觀念:

東南亞型甲型海洋性貧血(Southeast Asian type α-thalassemia,α0\alpha^0-thalassemia SEA 型)是由一段約 20 kb 的大片段缺失(large deletion,記作 SEA--^{SEA})造成,導致兩個 α-globin 基因(HBA1 和 HBA2)均缺失。偵測大片段缺失最快速、最直接的方法是 Gap-PCR(缺口式 PCR)。

選項分析

(A) ARMS(amplification refractory mutation system) ARMS(又稱 allele-specific PCR)是利用引子 3' 端與已知點突變完全互補才能延伸的原理,適合偵測**已知點突變(point mutation)**或小型插入/缺失(indel)。對於東南亞型的 ~20 kb 大片段缺失,無法以 ARMS 直接跨越缺口擴增,不適合作為大片段缺失的首選方法。

(B) Gap-PCR 最適合。 Gap-PCR 的設計邏輯是:在大片段缺失的兩端外側各設計一條引子(primer),正常染色體因距離過遠(>20 kb)無法有效擴增;而缺失染色體的缺口使兩端引子距離縮短,能夠高效擴增出一條特異性缺口 PCR 帶。帶因者(carrier)同

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