臺灣與大陸沿岸地區已鑑別出超過 36 種葡萄糖六磷酸去氫 酶缺乏症基因型，其造成基因變異的分子機制皆相同；根據其基因變異類型，下列何者是最不適合的分子檢驗方法？

本題觀念：

葡萄糖六磷酸去氫酶缺乏症（glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency, G6PD deficiency）是一種 X 染色體連鎖（X-linked）的遺傳性溶血性貧血（hemolytic anemia）。台灣及大陸沿岸地區已鑑別超過 36 種基因型，其分子機制幾乎全為點突變（point mutation）/ 單核苷酸變異（single nucleotide variant, SNV），即單一鹼基的替換（substitution）導致胺基酸改變。本題為正向題，問「最不適合」的分子檢驗方法。

選項分析

(A) 聚合酶連鎖反應－限制酶片段長度多型性（PCR-RFLP） PCR-RFLP 是偵測特定已知點突變（known SNP）的成熟方法。G6PD 基因的大多數突變為點突變，且這些突變通常會造成（或消除）特定限制酶（restriction endonuclease）的辨識序列，因此 PCR-RFLP 是適合偵測 G6PD 點突變的方法。已有多篇文獻驗證 PCR-RFLP 用於 G6PD 變異型鑑定的可行性。

(B) 簡單序列重覆區間（ISSR, inter simple sequence repeat）增幅法 ❌ 最不適合（=答案） ISSR 是一種以微衛星（mi

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