107年:(醫檢)檢驗(2)

關於檢體的 RNA 萃取與保存之敘述,下列何者錯誤?

ARNA 抽取後,可以用乙醇沈降並保存在 -70 ℃或更低溫
BRNA 可保存在 PBS (phosphate buffered saline )中
CRNA 檢體應避免重覆冰凍解凍
DRNase 可以在 -20 ℃降解 RNA

詳細解析

本題觀念:

RNA 萃取後的保存條件與 RNase 的特性。本題考核考生對 RNA 不穩定性、正確保存方式,以及 RNase 活性與溫度關係的掌握。

選項分析

(A) RNA 抽取後,可以用乙醇沈降並保存在 -70℃ 或更低溫 ✅
正確陳述。 乙醇沉降(ethanol precipitation)是 RNA 純化的標準方法。沉降後的 RNA 可懸浮於含乙醇的溶液中,保存於 -70°C 至 -80°C,可維持 RNA 完整性數月至數年。

(B) RNA 可保存在 PBS(phosphate buffered saline)中 ❌ ← 錯誤陳述(本題答案)
錯誤陳述。 PBS 是等張磷酸緩衝鹽溶液,並非 RNA 保存的適當介質。PBS 本身缺乏抗 RNase 保護劑,標準 PBS 無法抑制 RNase 活性,若有任何 RNase 污染便會迅速降解 RNA。正確保存介質應使用 RNase-free 水、TE buffer(含 EDTA 可螯合金屬離子抑制部分核酸酶),或專用 RNA 穩定試劑(如 RNAlater)。研究顯示組織 RNA 置於 PBS 保存一週即出現明顯降解,而 RNAlater 可維持 3 個月以上的完整性。

(C) RNA 檢體應避免重覆冰凍解凍 ✅
正確陳述。 反覆冷凍-解凍

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