利用 280 nm 吸光特性定量血中蛋白質含量，下列何者對測量準確度影響最小？

本題觀念：

利用 280 nm 紫外光吸收（UV absorbance）定量蛋白質，依賴的是蛋白質中特定芳香族胺基酸（aromatic amino acids）的吸光特性，主要為色胺酸（tryptophan）和酪胺酸（tyrosine）。葡萄糖（glucose）在 280 nm 無吸光，對測量準確度影響最小。

選項分析

(A) 游離 tryptophan（色胺酸） 干擾大。色胺酸（Trp）在 280 nm 有強烈吸光，是蛋白質 A₂₈₀ 測定中最主要的顯色來源（莫耳消光係數約 5,500 M⁻¹cm⁻¹）。游離的 Trp 存在樣本中時，會直接疊加於蛋白質訊號，高估蛋白質濃度。

(B) 游離 tyrosine（酪胺酸） 干擾明顯。酪胺酸（Tyr）在 280 nm 也有吸光（莫耳消光係數約 1,490 M⁻¹cm⁻¹），干擾程度雖較 Trp 小，但游離態存在時同樣會造成正干擾。

(C) glucose（葡萄糖） 正確答案——影響最小。 葡萄糖為無色透明的單醣，在 280 nm 波長下幾乎沒有吸光，不含芳香族結構或發色團，不會干擾 A₂₈₀ 蛋白質定量。

(D) bilirubin（膽紅素） 干擾顯著。膽紅素在 450 nm 附近有強吸光，但其分子在 280 nm 也有相當程度的吸光尾跡（tail absorption），

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