107年:(醫檢)免疫病毒(2)

操作西方墨點法( Western blot )之前,需要將在膠( polyacrylamide gels )上分開的蛋白質,轉移至:

Anitrocellulose filter
BHEPA filter
Ccellulose acetate paper
D0.22 µm filter

詳細解析

本題觀念:

西方墨點法(Western blot,又稱 immunoblotting)是分子生物學的重要技術,本題考核電泳分離後蛋白質的轉移目標載體(transfer membrane)。

選項分析

(A) nitrocellulose filter(硝酸纖維素濾膜) 正確。 在 Western blot 中,SDS-PAGE 分離的蛋白質透過電轉(electroblotting)轉移至 nitrocellulose(NC)膜上,NC 膜透過疏水性交互作用(hydrophobic interaction)非特異性地結合蛋白質,之後再進行抗體偵測。NC 膜是 Western blot 最早且最常用的轉移載體,蛋白質結合能力為 80-100 µg/cm²。另一常用膜為 PVDF(polyvinylidene difluoride)膜,結合能力更高(170-200 µg/cm²)。此為正確答案。

(B) HEPA filter(高效率空氣粒子過濾器) 錯誤。 HEPA filter(high-efficiency particulate air filter)是空氣過濾裝置,用於清潔室、生物安全櫃等,防止空氣中微粒汙染。與蛋白質轉移完全無關,無法結合蛋白質。

**(C) cellulose acetate paper

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