107年:(醫檢)檢驗(1)

純化好的 DNA 回溶於 0.5 毫升的緩衝液中,經稀釋 100 倍後,在260 nm 測得吸光值為 0.25 ,則總共有多少 µg的DNA?

A1250
B625
C500
D125

詳細解析

本題觀念:

DNA 濃度的分光光度計計算——利用 Beer-Lambert 定律,在 260 nm 波長下測量吸光值,結合稀釋倍數與體積計算總 DNA 含量。

選項分析

本題為計算題,需套用 DNA 濃度計算公式:

DNA 濃度(μg/mL)=A260×稀釋倍數×50  μg/mL\text{DNA 濃度} (\mu g/mL) = A_{260} \times 稀釋倍數 \times 50 \; \mu g/mL

說明:對於雙股 DNA(dsDNA),A260=1.0A_{260} = 1.0 對應濃度為 50  μg/mL50 \; \mu g/mL(在 1 cm 光徑下)。

已知條件:

  • 回溶體積:0.5  mL0.5 \; mL
  • 稀釋倍數:100×100 \times
  • 測得 A260=0.25A_{260} = 0.25(稀釋後測量值)

計算步驟:

第一步:計算稀釋後溶液的 DNA 濃度: 稀釋後濃度=0.25×50  μg/mL=12.5  μg/mL\text{稀釋後濃度} = 0.25 \times 50 \; \mu g/mL = 12.5 \; \mu g/mL

第二步:換算回原液濃度(乘以稀釋倍數 100): 原液濃度=12.5×100=1250  μg/mL\text{原液濃度} = 12.5 \times 100 = 1250 \; \mu g/mL

第三步:計算總 DNA 量(原液體積 × 原液濃度):

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