107年:(醫檢)檢驗(1)
下列何者不是即時聚合 酶連鎖反應( Real-time PCR )TaqMan 系統所用探針的報導螢光( Reporter )?
ABHQ1 (Black hole quencher )
BFAM (6-carboxyfluorescein )
CTET (6-tetrachlorofluorescein )
DCy3, Cy5 (Indodicarbocyanine )
詳細解析
本題觀念:
本題為反向題(問「何者不是」),考核 Real-time PCR TaqMan 系統中,探針使用的報導螢光基(reporter dye) vs 抑制螢光基(quencher) 的區別,以及各種螢光染料的分類。
選項分析
本題問的是「不是 Reporter」,即為 Quencher 的選項才是答案。
(A) BHQ1(Black hole quencher) ❌ BHQ1 是抑制螢光基(quencher),不是 reporter。Black Hole Quencher 系列(BHQ-1、BHQ-2、BHQ-3)是常見的非螢光暗淬滅劑(dark quencher),專門用來淬滅 reporter 的螢光訊號,本身不發螢光。此為正確答案(即「不是 reporter」)。✅
(B) FAM(6-carboxyfluorescein) ✅ FAM 是最常見的 TaqMan 探針報導螢光基,激發光約 494 nm,發射光約 520 nm(綠色螢光)。在 TaqMan 系統中廣泛使用。是 Reporter,不是答案。
(C) TET(6-tetrachlorofluorescein) ✅ TET 是 fluorescein 衍生物,屬於報導螢光基,激發光約 521 nm,
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