有關原位螢光雜交法（ Fluorescent in situ hybridization; FISH ）鑑定細菌菌種之敘述，下列何者錯誤？

本題觀念：

本題考核原位螢光雜交法（fluorescent in situ hybridization, FISH）用於細菌菌種鑑定的基本原理與特性，重點在於 FISH 探針的種類、靶標核酸類型、靈敏度及直接檢測能力。

選項分析

(A) 「檢測敏感度約在 $10^5$ CFU/ml」— ✅ 正確陳述。研究文獻（如囊腫纖維化患者痰液的 FISH 研究）指出，FISH 顯微鏡偵測細菌的極限約為 $4 \times 10^5$ CFU/ml，90% 敏感度即在此量級，選項所述正確。

(B) 「可直接用於檢測檢體」— ✅ 正確陳述。FISH 最大優點之一，即可直接以臨床檢體（如痰液、血液培養瓶內容物、組織切片）進行原位雜交，無需預先培養菌株，節省時間。

(C) 「可檢測檢體中的 DNA 或 RNA」— ✅ 正確陳述。FISH 探針可設計為針對 DNA（如基因組序列）或 RNA（如 16S rRNA）。應用於細菌菌種鑑定時，最常以 16S rRNA 為靶標（因核糖體 rRNA 拷貝數多，訊號強），但也可針對 DNA 目標。

(D) ❌ 「雜交反應是使用有標幟螢光的雙股 DNA 探針」— 錯誤陳述（本題答案）。FISH 探針的本質為**單股（single-stranded）螢光標幟寡核苷酸

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