107年:(醫檢)生化(1)
關於使用動力學分析血清 AST 活性的敘述,下列何者正確?
A要在血清與試劑混合後,立刻開始測
B要等待達最大反應速率( Vmax )時才開始測
C要在 lag phase 之後才開始測
D任選一段時間間隔都可以測
詳細解析
本題觀念:
動力學法(kinetic method)分析血清酵素活性時,何時才可開始計時測定——lag phase 結束後才能進行測量。
選項分析
(A) 要在血清與試劑混合後,立刻開始測 錯誤。血清與試劑混合後最初的時期稱為 lag phase(延滯相),此時反應尚未達到穩定狀態:試劑溫度平衡尚未完成、輔助酶(例如 AST 試劑中的蘋果酸去氫酶 MDH)正在消耗掉樣品中殘餘的內生性干擾物質(如血清中預存的草乙酸 oxaloacetate),反應速率尚不穩定,立刻測量將導致高估酵素活性。
(B) 要等待達最大反應速率(Vmax)時才開始測 錯誤。動力學測定酵素活性的理論基礎是「零級反應(zero-order kinetics)」——底物充足時,反應速率與底物濃度無關,僅取決於酵素量。動力學法利用的是線性相(linear phase)的固定速率,而非 Vmax 本身的概念。
(C) 要在 lag phase 之後才開始測 正確。動力學酵素分析的正確步驟:
- 血清 + 試劑混合 → 進入 lag phase(延滯相)
- Lag phase 期間:系統達到溫度平衡、干擾物質被消耗完畢
- Lag phase 結束 → 進入線性相(linear phase),反應速率恆定
- 在線性相期間,以固定時間間隔(如每分鐘)測定吸光
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