107年:(醫檢)生化(1)
利用 280 nm 波長定量蛋白質的濃度,主要是偵測下列那一種胺基酸?
A白胺酸(leucine )
B甘胺酸(glycine )
C酪胺酸(tyrosine )
D絲胺酸(serine )
詳細解析
本題觀念:
利用 280 nm 紫外線(UV)波長定量蛋白質,原理是蛋白質中含苯環的芳香族胺基酸(aromatic amino acids)能吸收 280 nm 的光。其中酪胺酸(tyrosine)和色胺酸(tryptophan)是主要貢獻者。
選項分析
(A) 白胺酸(leucine) 錯誤。白胺酸(leucine)是非極性脂肪族胺基酸,側鏈為異丁基,無苯環結構,不具有在 280 nm 吸收 UV 光的特性。
(B) 甘胺酸(glycine) 錯誤。甘胺酸(glycine)是最簡單的胺基酸,側鏈僅為氫原子(-H),無苯環或共軛雙鍵系統,不在 280 nm 有顯著吸收。
(C) 酪胺酸(tyrosine) 正確。酪胺酸(tyrosine)側鏈含有酚羥基(phenol ring),是芳香族胺基酸,在 280 nm 具有顯著的 UV 吸收。其莫耳消光係數(molar extinction coefficient)約為 1280–1490 M⁻¹cm⁻¹。色胺酸(tryptophan)的消光係數更高(約 5500 M⁻¹cm⁻¹),但題目問的是「主要偵測」的胺基酸——在臨床化學考題中,酪胺酸為標準答案,因多數臨床 A280 方法以酪胺酸作為主要校正依據,且絕大多數蛋白質均含有酪胺酸。
(D) 絲胺酸(serine) 錯誤。絲胺酸(
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