107年:(醫檢)生化(1)

以biuret 反應測定蛋白質,下列敘述何者錯誤?

A銅離子和 peptide 鍵反應
B以biuret 為標準品
C加入酒石酸可阻止銅沉澱
D加入碘化鉀可為抗氧化劑

詳細解析

本題觀念:

Biuret 反應是臨床化學中測定蛋白質(血清總蛋白)的經典方法。本題為反向題(問「何者錯誤」),需找出四個敘述中唯一不正確的選項。

選項分析

(A) 銅離子和 peptide 鍵反應 正確陳述。Biuret 反應的原理:鹼性環境下,Cu2+\text{Cu}^{2+} 與蛋白質中的肽鍵(peptide bond)(需含 2 個以上肽鍵)形成紫色螯合複合物,吸收波長 540–560 nm。

(B) 以 biuret 為標準品 錯誤陳述(本題答案)。Biuret 反應雖因 biuret 化合物(H2N-CO-NH-CO-NH2\text{H}_2\text{N-CO-NH-CO-NH}_2)能與銅離子產生相同顏色而得名,但實際測定蛋白質時,標準品是牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)或人血清白蛋白(human serum albumin, HSA),而非 biuret 化合物。Biuret 本身僅用於驗證反應原理,不作為臨床蛋白質定量的標準品。

(C) 加入酒石酸可阻止銅沉澱 正確陳述。Biuret 試劑的配方含有酒石酸鈉鉀(sodium potassium tartrate)。在強鹼性(NaOH)環境中,Cu2+\text{Cu}^{2+} 容易生成 Cu(OH)2\text{Cu(OH)}_2

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