107年:(醫檢)生化(1)
測定血清鹼性磷酸 酶活性時,下列何者測得結果最高?
A使用 carbonate 為反應的緩衝液,而且含有 MgCl₂
B使用 2-amino-2-methyl-1-propanol 為反應的緩衝液,而且含有 MgCl₂
C使用 borate 為反應的緩衝液,而且含有 EDTA
D使用 glycine 為反應的緩衝液,而且含有 EDTA
詳細解析
本題觀念:
鹼性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)活性測定的緩衝液系統與金屬離子輔因子對測定結果的影響
ALP 是一種需要鋅()和鎂()作為輔因子的金屬酵素,其最適 pH 為 9.5–10.5 之間。緩衝液的種類和金屬離子的存在對 ALP 活性的測定結果有顯著影響。
選項分析
(A) Carbonate 緩衝液 + MgCl₂ Carbonate 緩衝液並非 ALP 測定的標準緩衝液,AMP(2-amino-2-methyl-1-propanol)和 DEA(二乙醇胺)才是 IFCC/AACC 推薦使用的緩衝液。雖然含 MgCl₂ 有助維持酵素活性,但 carbonate 緩衝液會限制 ALP 活性,測得值較低。
(B) 2-amino-2-methyl-1-propanol(AMP)緩衝液 + MgCl₂ AMP 緩衝液是 IFCC/AACC 推薦的 ALP 測定標準緩衝液(pH 10.3–10.5),AMP 本身可作為磷酸基的接受體(phosphate acceptor),加速底物 4-硝基苯磷酸(4-NPP)的水解,顯著提升酵素活性。同時,MgCl₂ 提供 作為 ALP 的必要輔因子,進一步激活酵素。兩者結合使得
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