107年:(醫檢)免疫病毒(1)
下列有關流式細胞分析儀( flow cytometry )之敘述,何者錯誤?
A可以分離及純化細胞內蛋白質
B可以分析細胞大小
C可以分析細胞顆粒性
D可以分析螢光標示之細胞
詳細解析
本題觀念:
流式細胞分析儀(flow cytometry)的原理與應用範圍。Flow cytometry 是一種利用雷射光與螢光訊號對細胞進行快速多參數分析的技術,可測量細胞大小、顆粒性(granularity)、及螢光標示的標誌。本題為反向題(問何者「錯誤」)。
選項分析
(A) 可以分離及純化細胞內蛋白質——❌ 錯誤陳述(本題答案)。Flow cytometry(包含 FACS)所「純化」的對象是細胞群體(cell populations),而非「細胞內蛋白質(intracellular proteins)」本身。若要偵測胞內蛋白(如磷酸化蛋白、轉錄因子),需先將細胞固定(fixation)+通透化(permeabilization),此過程會破壞細胞活性;flow cytometry 無法從混合物中純化游離蛋白質,蛋白質純化應使用其他方法(如免疫沉澱、親和層析等)。
(B) 可以分析細胞大小——✅ 正確陳述。Forward scatter(FSC)訊號與細胞大小(體積)成正相關,是 flow cytometry 的基本參數之一。
(C) 可以分析細胞顆粒性——✅ 正確陳述。Side scatter(SSC,90° 散射光)與細胞內部複雜度(顆粒性、granularity)相關,可區分如顆粒球(granular cells
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