在complement-mediated cytotoxicity 實驗中，最後加入 trypan blue 之目的為何？

本題觀念：

補體媒介細胞毒殺試驗（complement-mediated cytotoxicity test）又稱為微量淋巴球毒殺試驗（microlymphocytotoxicity test），是 HLA 血清學分型的標準方法。試驗結束後加入台盼藍（trypan blue）染液，用於區分活細胞與死細胞，判讀細胞毒殺的程度。

選項分析

(A) 觀察有無死細胞，死細胞呈藍色：正確。台盼藍是「生死鑑別染料」（vital dye），其原理是：活細胞的細胞膜完整，可排除台盼藍（dye exclusion），不染色（無色）；**死細胞（被補體裂解後的細胞）**膜通透性增加或破損，台盼藍可自由進入細胞內，染成藍色。

(B) 觀察有無死細胞，活細胞呈藍色：錯誤。台盼藍染的是「死細胞」而非活細胞，此敘述顛倒了染色原理。

(C) 將細胞殺死，為實驗之陽性對照：錯誤。台盼藍本身不是細胞毒性試劑，不用於殺死細胞，也不是陽性對照的設計方式。

(D) 降低背景光線，以利顯微鏡觀察：錯誤。台盼藍的功能是染色區分死活細胞，與降低背景光線無關。

答案解析

補體媒介細胞毒殺試驗（complement-mediated cytotoxicity）的流程如下：

1. 將待測淋巴球（目標細胞）加入微孔盤
2. 加入已知特異性的 HLA 抗

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