107年:(醫檢)免疫病毒(1)
C型肝炎病毒的定性分析,最常在 5’端非轉譯區設計探針的主要原因為何?
A該區序列高度保留,避免偽陰性
B該區不會製造蛋白,避免干擾
C該區沒有 2級結構,不會破壞基因體
D該區在基因體的 5’端,反應迅速
詳細解析
本題觀念:
C 型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)的分子診斷(定性分析、viral load 定量)最常以 5' 非轉譯區(5' untranslated region, 5' UTR)設計引子(primer)與探針(probe)。本題考核選擇 5' UTR 作為探針設計目標區域的主要原因。
選項分析
(A) 該區序列高度保留,避免偽陰性 HCV 5' UTR(長約 324–341 核苷酸)是整個 HCV 基因體中序列多樣性最低的區域,在所有已知的 HCV 基因型(genotypes 1–7)和亞型(subtypes)之間均高度保守。此特性使得以 5' UTR 設計的引子和探針能偵測所有 HCV 基因型的感染,不會因基因型差異導致引子/探針無法結合而出現偽陰性(false negative)。這是 HCV 5' UTR 成為分子診斷首選靶區的核心理由,也是 Abbott RealTime HCV、Roche Amplicor 等主要商業化檢測平台的共同設計基礎。
(B) 該區不會製造蛋白,避免干擾 5' UTR 確實屬於非編碼區(non-coding region),不直接編碼蛋白質。但這並非選擇此區域作為探針目標的主要理由——PCR/RT-PCR 是針對 RNA/DNA 的核酸擴增,蛋白
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