108年:放射治療(2)

下列何種技術最適合⽤來檢測 DNA 雙股斷裂?

AFISH (fluorescent in situ hybridization )
BSouthern Blot
CγH2AX foci assay
Dmicroarray assay

詳細解析

本題觀念:

本題考查偵測 DNA 雙股斷裂(DNA double-strand breaks, DSBs)最適合的技術。DSBs 是輻射造成最嚴重的 DNA 損傷形式,能準確偵測 DSBs 的技術在輻射生物學研究與臨床劑量評估中至關重要。

選項分析

(A) FISH(fluorescent in situ hybridization) FISH 利用螢光探針與特定 DNA 序列雜交,主要用來偵測染色體數目異常、基因重排、基因擴增或特定基因位置,而非直接偵測 DSBs。雖然 DBD-FISH(DNA Breakage Detection-FISH)的衍生技術可間接偵測 DNA 斷裂,但靈敏度和特異性遠不及 γH2AX foci assay,且操作繁複。FISH 不是偵測 DSBs 的「最適合」方法。

(B) Southern Blot Southern Blot 是傳統的 DNA 偵測技術,可偵測已知位置的 DSBs(以限制酶消化後,用特異性探針雜交),但操作耗時(需數天)、需要大量 DNA、靈敏度低,且只能偵測預先知道位置的斷裂。對於輻射誘發的隨機分布 DSBs 並不實用。

(C) γH2AX foci assay ✅ 正確答案 γH2AX foci assay 是目前偵測 DNA DSBs 的黃金標準(gold standard)。當

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