105年:藥學二(第2次)

以液相層析法分析中性化合物時,波峰產生嚴重的拖尾現象,其可能的原因為下列何者?

A注入的檢品量太少
B層析溫度過高
C化合物的滯留時間太短
D管柱的入口處與充填劑之間有空隙產生

詳細解析

本題觀念:

本題考液相層析法(liquid chromatography, LC)中波峰拖尾(peak tailing)的成因。需辨別在中性化合物這一前提下,哪種情況最可能造成嚴重的拖尾現象。

選項分析

(A) 注入的檢品量太少

注入樣品量太少(underloading)通常不會造成拖尾,反而可能使波峰變小或訊號雜訊比下降。樣品量過多(overloading)才可能因靜相吸附位點飽和而出現拖尾或峰形扭曲。❌

(B) 層析溫度過高

層析溫度過高一般會使保留時間縮短(化合物與靜相作用減弱)、峰形變窄(擴散加速促進傳質),通常有改善峰形的效果,並不會導致嚴重拖尾。❌

(C) 化合物的滯留時間太短

滯留時間太短(retention time too short)意味著化合物與靜相作用弱,會比較快洗出。這與拖尾並無直接因果關係,且滯留時間短的化合物若在死時間附近洗出,峰形反而通常較對稱。❌

(D) 管柱的入口處與充填劑之間有空隙產生

管柱入口處出現空隙(void)是造成波峰拖尾、分裂或峰形扭曲最典型的物理性原因。空隙的成因包括填充劑(packing material)機械壓縮塌陷、長期使用磨損、或填充劑沉降。有空隙時:

  • 部分樣品分子沿空隙快速通過(通道效應,channeling)

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