105年:醫學二(1)
建立基因剔除鼠( knockout mouse )的過程中,一般以取出實驗動物之何種細胞進行基因剔除?
A卵細胞
B精細胞
C受精卵
D胚胎幹細胞
詳細解析
本題觀念:
建立基因剔除鼠(knockout mouse)的傳統方法,是利用胚胎幹細胞(embryonic stem cells, ES cells)進行同源重組(homologous recombination),將目標基因以損壞或替換的方式「敲除」,再將修改後的 ES 細胞注入囊胚(blastocyst),最終獲得具有特定基因缺失的小鼠模型。
選項分析
(A) 卵細胞 卵細胞(egg cell / oocyte)可用於某些基因修改技術(如早期的顯微注射法建立轉殖基因鼠),但傳統 knockout mouse 技術並非從卵細胞出發,因為卵細胞難以在體外長期培養並進行複雜的同源重組篩選。
(B) 精細胞 精細胞(sperm cell)通常用於精子注射(ICSI)或某些基因轉殖技術,但不是建立 knockout mouse 的主要細胞來源。
(C) 受精卵 受精卵(fertilized egg / zygote)可用於直接顯微注射 DNA 或 CRISPR-Cas9,建立轉殖基因鼠(transgenic mouse),但不是傳統 knockout mouse 的標準方法(無法高效進行同源重組)。
(D) 胚胎幹細胞 正確。傳統 knockout mouse 的標準流程:
- 從小鼠囊胚內細胞塊
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