使用 fluorescein 標定時，其所需之激發光（ excitation light ）為多少 nm ？

本題觀念：

Fluorescein（螢光素）及其常見衍生物 Fluorescein Isothiocyanate（FITC）是臨床與研究實驗室最常用的螢光標定劑之一，廣泛應用於免疫螢光法（immunofluorescence）、流式細胞術（flow cytometry）及螢光免疫分析（fluorescent immunoassay）。了解其激發光（excitation）與放射光（emission）波長是操作螢光儀器的基礎。

選項分析

(A) 313 nm 313 nm 屬於紫外光範圍。Fluorescein 在此波長的吸收率極低，不是其主要激發光。此波長更接近某些香豆素類（coumarin）螢光染料的激發波長。

(B) 490 nm Fluorescein/FITC 的最大激發波長（excitation maximum）約為 490–495 nm，落在藍光範圍。吸收此波長後，可放射出約 519–525 nm 的綠色螢光。此為正確答案。

(C) 540 nm 540 nm 更接近 Rhodamine B 等紅橙色螢光染料的激發波長，並非 Fluorescein 的激發波長。

(D) 578 nm 578 nm 屬橙黃色光，接近 Rhodamine 6G 或 PE（Phycoerythrin）的激發或放射範圍，不適用於 F

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