106年:(醫檢)檢驗(1)
DNA 晶片主要是藉由下列何種反應來作偵測?
A雜交(Hybridization )
B放大(Amplification )
C接合(Ligation )
D切割(Cleavage )
詳細解析
本題觀念:
DNA 晶片(DNA microarray,又稱基因晶片)是一種高通量的核酸分析技術,其核心偵測原理是基於核酸互補序列之間的**雜交(hybridization)**反應。本題考察 DNA 晶片的基本偵測機制。
選項分析
(A) 雜交(Hybridization)→ 正確答案 DNA 晶片的偵測原理:晶片(固相載體,如玻璃或矽晶片)上固定有數千至數十萬個已知序列的 DNA 探針(probes)。待測樣品的 RNA 被逆轉錄為 cDNA 後,以螢光染料(fluorescent dye)標記,再與晶片探針進行雜交。互補序列之間形成氫鍵配對,雷射掃描偵測螢光訊號強度,即代表目標基因的表現量或突變狀態。
(B) 放大(Amplification) 雖然在準備待測樣品時可能使用 PCR 擴增,但這是樣品前處理步驟,不是 DNA 晶片本身的偵測機制。晶片的偵測機制是雜交,而非擴增。
(C) 接合(Ligation) Ligation(連接酶反應)常用於 DNA 選殖(cloning)或連接酶鏈反應(ligase chain reaction, LCR)等技術,DNA 晶片偵測不依賴連接酶反應。
(D) 切割(Cleavage) 切割反應常見於限制酶(restriction enzyme)分析或核酸酶保護試驗,不是 D
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