106年:(醫檢)生化(1)
下列關於離子交換層析法測量糖化血紅素之敘述,何者錯誤?
A溶血會干擾
B移動相梯度會影響分離
C待測物質較血紅素帶更多正電
D偵測器是比色計
詳細解析
本題觀念:
本題考離子交換層析法(ion exchange chromatography)測量糖化血紅素(glycated hemoglobin, HbA1c)的原理與干擾因素。為反向題,需找出「錯誤」的敘述。
選項分析
(A) 溶血會干擾 ❌ 此為錯誤敘述(= 答案) 離子交換 HPLC 法測量 HbA1c 時,樣本本身就需要先溶解(lyse)紅血球——這是標準前處理步驟,目的是釋放血紅素供分析。「溶血」(hemolysis)在此情境下是「必要的前處理」而非干擾。因此,「溶血會干擾」的說法是錯誤的。(真正的干擾因素包括異常血紅素如 HbS、HbC、HbF 等,而非溶血本身。)
(B) 移動相梯度會影響分離 ✅ 正確 在 HPLC 中,移動相(mobile phase)的離子強度梯度(ionic strength gradient)或 pH 梯度直接決定不同血紅素分子的洗脫時間與分離效果,這是正確的。
(C) 待測物質較血紅素帶更多正電 ✅ 正確(需理解「待測物質」指的是正常 HbA0) 在陽離子交換層析中,HbA1c(糖化血紅素)因糖化作用遮蔽了 β-鏈 N 端的胺基,正電荷減少,與固定相的親和力較低,先被洗脫出來。相對地,HbA0(未糖化血紅素)帶較多正電荷,與固定相結合較緊,後被洗脫。因此「待測物
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