106年:(醫檢)生化(1)

欲以酵素的活性作為某疾病的指標,則使用下列那一個受質濃度來進行反應時,所測得的結果應最具可信度?

A1/2 倍Km
B2倍Km
C5倍Km
D20 倍Km

詳細解析

本題觀念:

此題考酵素活性測定(enzyme activity assay)的方法學原理。酵素活性是反映樣品中酵素量的指標;為了讓測定結果準確反映酵素濃度而非受質濃度,需在最大反應速率(Vmax)條件下進行測定,即受質必須達到飽和濃度(saturating concentration)。

選項分析

(A) 1/2 倍 Km[S]=0.5×Km[S] = 0.5 \times K_m,代入 Michaelis-Menten 方程式: v=Vmax0.5KmKm+0.5Km=Vmax333%Vmaxv = \frac{V_{max} \cdot 0.5K_m}{K_m + 0.5K_m} = \frac{V_{max}}{3} \approx 33\% V_{max} 反應速率大幅依賴受質濃度,測出的活性無法準確代表酵素量。不適合。

(B) 2 倍 Km[S]=2Km[S] = 2K_mv=Vmax2KmKm+2Km=23Vmax67%Vmaxv = \frac{V_{max} \cdot 2K_m}{K_m + 2K_m} = \frac{2}{3} V_{max} \approx 67\% V_{max} 雖高於 Km,但受質仍未達飽和,結果受受質濃度影響仍大。不夠理想。

(C) 5 倍 Km[S]=5Km[S] = 5K_m

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