106年:(醫檢)免疫病毒(1)
採用間接免疫螢光分析法( indirect immunofluorescent assay )測定檢體中的梅毒螺旋菌抗體時,必須使用下列何種試劑組合?
A患者血清/ fluorescein-labeled killed Treponema pallidum
B患者生殖道滲出液/ fluorescein-labeled rabbit anti-human 抗體
Ckilled Treponema pallidum /fluorescein- 標示之患者血清/ rabbit anti-human 抗體
Dkilled Treponema pallidum /患者血清/ fluorescein-labeled rabbit anti-human 抗體
詳細解析
本題觀念:
本題考查間接免疫螢光分析法(indirect immunofluorescent assay, IFA)的操作原理,特別是用於偵測梅毒(syphilis)螺旋菌(Treponema pallidum)抗體時的試劑組合順序。本題即為間接螢光抗體-吸附試驗(fluorescent treponemal antibody-absorption test, FTA-ABS)的操作邏輯。
選項分析
間接免疫螢光法的三層反應邏輯:
- 第一層(抗原):已知抗原固定於載玻片
- 第二層(初次抗體):患者血清(含待測抗體)
- 第三層(螢光標示二次抗體):螢光標示的抗人類抗體(偵測第二層)
(A) 患者血清 / fluorescein-labeled killed Treponema pallidum ❌ 不正確。 此組合中螢光標示在 T. pallidum 上,此為**直接法(direct IFA)**的設計思路,且邏輯錯誤——直接法是用螢光抗體直接偵測抗原,不需患者血清作為媒介層。
(B) 患者生殖道滲出液 / fluorescein-labeled rabbit anti-human 抗體 ❌ 不正確。 此組合遺漏了第一層的已知抗原(T. pallidum)。沒有抗原固定在載玻片
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