106年:(醫檢)免疫病毒(1)

下列有關單向輻射免疫擴散分析( single radial immunodiffusion )的敘述,何者正確?

A待測物置於抗原槽內,先進行電泳
B血清放在血清槽中,先進行電泳
C待測物的濃度和其擴散直徑平方成正比
D此分析法僅能應用於抗原或抗體的定性分析

詳細解析

本題觀念:

單向輻射免疫擴散分析(single radial immunodiffusion, SRID),又稱 Mancini 法,是一種定量免疫學技術,用於測定血清中免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)及補體等蛋白質的濃度。本題考查其基本原理與操作特性。

選項分析

(A) 待測物置於抗原槽內,先進行電泳 錯誤。 SRID 不需要先進行電泳步驟。操作方式是將含抗體的凝膠(agarose gel)預先製備好,抗體均勻混入凝膠中,然後在凝膠上打孔(well),將待測抗原(血清樣本)直接加入孔中,讓其自然向四周放射狀擴散,不需要電泳。(需要電泳步驟的是免疫電泳法 immunoelectrophoresis 或免疫固定法 immunofixation)

(B) 血清放在血清槽中,先進行電泳 錯誤。 理由同 (A),SRID 不進行電泳。此敘述描述的較像是免疫電泳法(immunoelectrophoresis)的步驟。

(C) 待測物的濃度和其擴散直徑平方成正比正確答案 正確。 這是 SRID 最核心的定量原理(Mancini 原理):

πr2=kC\pi r^2 = k \cdot C

即沉澱環面積(πr2\pi r^2)正比於抗原濃度(CC),因此**抗原濃度與擴散直徑的平方(d2d^2)成正

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