有關競爭結合型放射免疫分析實驗進行時的四個步驟，其順序下列何者正確？ ①進行免疫反應（incubation ） ②將處理好的試管檢體送入加馬計數器檢測 ③將檢體、試劑混合 ④將結合抗原與未結合抗原分離

本題觀念：

競爭結合型放射免疫分析（competitive binding radioimmunoassay, RIA）是利用放射性標記抗原（通常為 $^{125}$I 標記）與待測樣本中的未標記抗原，競爭結合有限量特異性抗體的原理，定量測定樣本中抗原濃度的方法。本題考查正確的操作步驟順序。

四個步驟定義：

• ① 進行免疫反應（incubation）：讓標記抗原、待測抗原與抗體充分競爭結合，達到平衡
• ② 將處理好的試管檢體送入加馬計數器（gamma counter）檢測
• ③ 將檢體、試劑混合：加入待測樣本、已知量的放射性標記抗原（$^{125}$I-抗原）及限量抗體
• ④ 將結合抗原（bound）與未結合抗原（free）分離：離心、PEG 沉澱或固相分離法

選項分析

(A) ①②③④ — 錯誤：先進行免疫反應（incubation）再混合，步驟顛倒，不合邏輯。 (B) ③②④① — 錯誤：混合→計數→分離→反應，計數放在分離之前毫無意義（尚未分離即計數）。 (C) ③④②① — 錯誤：混合→分離→計數→反應，反應放在最後，且分離在反應前，邏輯錯誤。 (D) ③①④② — 正確：混合→反應→分離→計數。此為正確答案。

答案解析

正確答案為 (D)（③①

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