利用 Sanger method 定序 DNA，使用之試劑 dideoxy analog 具有下列那一種功能？

本題觀念：

Sanger 定序法（Sanger sequencing），又稱鏈終止法（chain termination method），是由 Frederick Sanger 於 1977 年發展的 DNA 定序技術。其核心試劑為 雙去氧核苷酸類似物（dideoxynucleotide analogs, ddNTPs），其特殊結構決定了它在 DNA 合成中所扮演的關鍵角色。

選項分析

(A) 可中止 DNA 合成 正確答案。 ddNTPs（如 ddATP, ddGTP, ddCTP, ddTTP）與正常 dNTPs 的差異在於：其核糖的 3' 碳位置缺少羥基（$\text{-OH}$）（正常 dNTP 的 3'-OH 是形成磷酸二酯鍵的關鍵）。當 DNA 聚合酶隨機將 ddNTP 摻入延伸中的 DNA 鏈時，由於缺少 3'-OH，無法與下一個 dNTP 的 5'-磷酸形成磷酸二酯鍵，DNA 合成因此不可逆地終止。這一鏈終止效應正是 Sanger 法讀取 DNA 序列的基礎。

(B) 水解斷裂 DNA 之磷酯鍵 不正確。 水解磷酸二酯鍵是核酸酶（nuclease）或限制酶（restriction enzyme）的功能，與 ddNTPs 無關。

(C) 是合成引子（primer）的成分 **不正確。

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