104年:醫學二(1)

下列何者是選殖質體( cloning plasmids )的正確描述?

A在大腸桿菌 DNA複製( replication )時,環狀質體( circular plasmids )不需要複製起點( origin of replication )
B可用以選殖約 50 Kb鹼基對( kilo-base pairs )的外來 DNA
C通常不需抗生素抗藥性基因( antibiotic resistant gene )
D需要特定限制酶切點( unique restriction enzyme site )以供選殖外來 DNA之用

詳細解析

本題觀念:

選殖質體(cloning plasmids)是基因工程中最常用的載體,用於將外來 DNA 導入大腸桿菌(E. coli)等宿主菌中複製和表現。一個功能完整的選殖質體必須具備三大核心元件:複製起點(origin of replication, ori)選擇標記(通常為抗生素抗藥性基因)、以及限制酶切點(restriction enzyme site)

選項分析

(A) 在大腸桿菌 DNA 複製時,環狀質體不需要複製起點(origin of replication) 不正確。 這是最根本的錯誤概念。質體要在宿主菌中自主複製,必須具有自己的複製起點(ori)。沒有 ori,質體無法被宿主的複製機器識別並複製,每次細胞分裂後質體就會被稀釋消失。不同 ori(如 ColE1、pMB1、pSC101)決定質體的拷貝數(copy number)和寄主相容性。

(B) 可用以選殖約 50 Kb 鹼基對(kilo-base pairs)的外來 DNA 不正確。 一般選殖質體(如 pUC、pBR322 系列)的外來 DNA 嵌入容量通常在 5–15 kb 以內;若插入片段過大(>20 kb),質體在細菌中的轉形效率和穩定性會大幅下降。能容納 ~50 kb 插入片段的載體是 **Cosmid(

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