使用broth dilution method 進行黴菌抗生素感受性試驗，最常使用下列何種培養基？
詳細解析
本題觀念
真菌（黴菌）的抗生素感受性試驗與細菌藥敏試驗使用不同的培養基。美國臨床和實驗室標準協會（CLSI）在 M27 文件（酵母菌）及 M38 文件（絲狀真菌）中明確規定，以液體稀釋法（broth dilution method）進行真菌藥敏試驗時，標準培養基為 RPMI 1640，並以 0.165 M MOPS 緩衝液調整至 pH 7.0。本題選項中的 RMPI 1640 為 RPMI 1640 的印刷筆誤。
選項分析
A. Müeller-Hinton medium
穆勒-亨頓培養基是細菌藥敏試驗的標準培養基，適用於 CLSI M07 的稀釋法及 M02 的紙碟擴散法（Kirby-Bauer method）。此培養基的營養組成針對細菌生長優化，不適用於真菌的藥敏試驗。
B. RMPI 1640
RPMI 1640（此處 RMPI 為筆誤）是 CLSI 規定的真菌藥敏標準培養基，含 L-glutamine 但不含碳酸氫鈉，需加入 0.165 M MOPS 作為緩衝系統維持 pH 7.0。選用 RPMI 1640 的原因在於其組成較貼近宿主體內環境，能更準確地預測抗真菌藥物的體內療效。
C. Middlebrook 7H10
Middlebrook 7H10 是分枝桿菌專用培養基，主要用於結核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis）等分枝桿菌的分離培養與藥敏試驗。此培養基含有 OADC 營養因子及孔雀石綠（malachite green）以抑制雜菌生長，與真菌藥敏試驗無關。
D. Löwenstein-Jensen
LJ 培養基是一種以蛋為基底的固體培養基，專門用於分枝桿菌（特別是結核菌）的分離培養。其成分中同樣含有孔雀石綠作為選擇性抑菌劑，與真菌藥敏試驗的用途完全不同。
答案解析
本題正確答案為 B。進行真菌液體稀釋法藥敏試驗時，CLSI M27 及 M38 標準明確指定使用 RPMI 1640 培養基。其他三個選項各有其特定用途：Mueller-Hinton 用於細菌藥敏，Middlebrook 7H10 及 Löwenstein-Jensen 則均為分枝桿菌培養專用。考生需掌握不同微生物藥敏試驗所對應的標準培養基。
核心知識點
- 真菌藥敏試驗（broth dilution）標準培養基：RPMI 1640 + 0.165 M MOPS（pH 7.0）
- 細菌藥敏試驗標準培養基：Mueller-Hinton medium
- 分枝桿菌培養專用培養基：Middlebrook 7H10（含 OADC）、Löwenstein-Jensen（蛋基固體）
- CLSI 文件對照：M27（酵母菌藥敏）、M38（絲狀真菌藥敏）、M07（細菌稀釋法藥敏）
參考資料
- CLSI M27 Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts (https://clsi.org/shop/standards/m27/)
- Factors influencing susceptibility testing of antifungal drugs: a critical review of document M27-A4 from CLSI. PMC. (https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC7688838/)
- Comparison of Lowenstein-Jensen Medium, Middlebrook 7H10 Medium and MB/BacT for Isolation of M. tuberculosis. PubMed. (https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23373033/)