114年:(醫檢)微生(2)

有關腸桿菌科( Enterobacteriaceae )的特性敘述,下列何者最不適當?

AVoges-Proskauer test 是針對細菌發酵丙酮酸鹽過程中產生的 acetoin做測試
B不具有cytochrome C oxidase 活性,因此不能將 tetramethyl -p-phenylenediamine 氧化,呈現深藍紫色
C不具有nitrate reductase ,不能將硝酸鹽( nitrate)還原成亞硝酸鹽( nitrite)
D尿素酶( urease)將urea分解產生氨( ammonia),進而使培養基偏鹼性

詳細解析

本題觀念:

鑑別腸桿菌科(Enterobacteriaceae)常用一系列生化試驗,包括氧化酶(oxidase)、硝酸還原(nitrate reduction)、Voges–Proskauer(VP)及尿素酶(urease)等,以區分腸桿菌與其他革蘭氏陰性桿菌。

選項分析

  • 選項A
    Voges–Proskauer 測試是檢驗細菌在2,3-butanediol發酵路徑中,將丙酮酸鹽中間產物 acetoin 轉化為二羰基化合物(diacetyl),再與 α-萘酚及 KOH 顯色,呈粉紅紅色,通用於鑑別 VP 陽性的 Enterobacter、Klebsiella 等屬 (en.wikipedia.org)。敘述正確。

  • 選項B
    腸桿菌科普遍缺乏 cytochrome c oxidase,oxidase 試驗以 tetramethyl-p-phenylenediamine 作為底物,若無此酵素則不會氧化成深藍至紫色,故稱 oxidase-negative (sciencedirect.com)。敘述正確。

  • 選項C
    Enterobacteriaceae 幾乎全數具有 nitrate reductase,可將硝酸鹽(NO₃⁻)一步還原為亞硝酸鹽(NO₂⁻),此特性常用於鑑別〈Enterobacteriaceae〉與其他非發酵型革蘭氏陰性桿菌 (asm.org)。敘述「不具有 nitrate reductase,不能還原硝酸鹽」明顯錯誤。

  • 選項D
    尿素酶(urease)催化尿素水解成氨(NH₃)及二氧化碳(CO₂),釋放的氨使培養基 pH 上升,指示劑(如 phenol red 或 bromcresol purple)由黃轉粉紅或紅色,鑑別 Proteus、Morganella、Yersinia 及部分 Klebsiella 等屬 (asm.org)。敘述正確。

答案解析

腸桿菌科典型特徵包括:

  1. Oxidase negative(選項B正確)
  2. 多數能以硝酸鹽作為電子受體, catalyze nitrate → nitrite(選項C錯誤)
  3. 依發酵產物不同分為 mixed-acid fermentation(MR-positive)、2,3-butanediol fermentation(VP-positive)(選項A正確)
  4. 部分菌種產尿素酶,使培養基鹼化(選項D正確)
    唯一不符合實際生化行為的是選項C,因此最不適當。

核心知識點

  • Enterobacteriaceae 生化鑑別:
    1. Oxidase test:缺 cytochrome c oxidase → oxidase-negative
    2. Nitrate reduction test:具 nitrate reductase → NO₃⁻ → NO₂⁻
    3. Methyl Red/Voges–Proskauer test:mixed-acid fermentation (MR⁺) vs. 2,3-butanediol fermentation (VP⁺)
    4. Urease test:部分屬(Proteus、Morganella、Yersinia、Klebsiella)urease-positive
  • 培養基及顯色試劑:
    • Oxidase:tetramethyl-p-phenylenediamine
    • Nitrate reduction:sulfanilic acid + α-naphthylamine (+ zinc)
    • VP:KOH + α-naphthol
    • Urease:phenol red 或 bromcresol purple
  • 臨床應用:
    • 快速區分臨床分離菌株,決定進一步抗性檢測與治療方向
    • Enterobacteriaceae 病原如 Escherichia coli、Klebsiella pneumoniae 等常見於尿道感染、腹膜炎、肺炎等,biochemical profile 有助於科學診斷與防治