下列何種染色最不適用於真菌（ fungi）的檢查？

本題觀念：

針對真菌（fungi）直接鏡檢時，需使用能清除背景並標示真菌細胞壁構造（主要為含有chitin的多醣）的染劑，以利觀察菌絲、分生孢子或酵母細胞等真菌特徵。

選項分析

• 選項A 10％ KOH + lactophenol cotton blue
  KOH 可溶解角質與細胞碎屑，使樣本背景清晰；lactophenol cotton blue（LPCB）中的 cotton blue 可選擇性染色真菌細胞壁之 chitin，phenol 則殺菌固定，lactic acid 作為保護劑。此法為經典的真菌直接鏡檢染色法，能明顯顯示菌絲與孢子等結構 (microbiology.mlsascp.com)。

• 選項B calcofluor white
  Calcofluor white 為一螢光染劑，能與 fung al cell wall 的 chitin、cellulose 結合，在紫外光下呈現藍白或綠色螢光，可快速篩檢各種臨床樣本中的真菌元素 (en.wikipedia.org)。

• 選項C Gram stain
  雖然主要為細菌分型染色，真菌（尤其酵母及部分菌絲）也因細胞壁含多醣而呈現 gram-positive（紫色），在腦脊髓液、唾液、痰液等標本中可同時偵測真菌與細菌。雖敏感度不及專用黏膜或組織銀染，但仍可作初步篩檢 (microbiology.mlsascp.com)。

• 選項D iodine stain
  一般指 Lugol’s iodine 或碘-碘化鉀液，主要用於寄生蟲囊體（如Entamoeba、Giardia）的對比染色，藉由染色核仁或醣原顆粒增強內部結構對比。此法非專為真菌設計，且尊重器常造成原位停滑，並不適用於真菌檢查 (hardydiagnostics.com)。

答案解析

Iodine stain（選項D）最不適合用於真菌檢查，其硫氰酸鈉或 Lugol’s iodine 的應用範圍限於寄生蟲學，並非對真菌細胞壁的 chitin 有專一染色能力，亦不具固定或殺菌功能，無法有效展示真菌形態細節。其他三種染色法皆以不同機制標示真菌細胞壁或清除背景，常見於臨床及研究室真菌學檢驗。

核心知識點

• 真菌直接鏡檢基本染色法
  • 10％ KOH wet mount：清除角質、透明化背景
  • Lactophenol cotton blue：染色 chitin、固定（phenol）、保存（lactic acid）
• 螢光染劑
  • Calcofluor white：結合 chitin、cellulose，在 UV 下螢光顯影
• 通用染色法
  • Gram stain：真菌亦呈 gram-positive，可同時偵測
• 非適用染色
  • Iodine stain（Lugol’s iodine）：寄生蟲濕製片用，非專用於真菌
• 其他常見真菌組織染色：GMS、PAS、India ink、Melzer’s reagent 等

臨床重要性

真菌感染常需快速篩檢及確定病原，選擇合適的染色法能顯著提高初步診斷速度與準確度，避免誤診並促進早期給藥治療。