113年:(醫檢)檢驗(2)
DNA經重亞硫酸鈉處理,再轉換為鹼性環境後,未甲基化的胞嘧啶會轉換為何?
A胞嘧啶
B胸腺嘧啶
C尿嘧啶
D5-甲基胞嘧啶
詳細解析
本題觀念:
此題考 DNA 甲基化分析中「重亞硫酸鈉(sodium bisulfite)轉化」的化學原理:在酸性環境下,重亞硫酸根離子會選擇性地對未甲基化的胞嘧啶(cytosine)進行磺化和脫胺反應,最後經鹼性條件脫除磺酸基,生成尿嘧啶(uracil)。而 5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine)位置因甲基保護而不被脫胺,仍維持胞嘧啶結構,成為辨別 DNA 甲基化狀態的金標準方法。 (pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)
選項分析
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選項A 胞嘧啶
直接留作原形的僅有經甲基化保護的 5-甲基胞嘧啶;未甲基化時,胞嘧啶會被脫胺,故選項 A 不符。 (diagenode.com) -
選項B 胸腺嘧啶
在 PCR 擴增步驟中,經脫氫脫氧後的尿嘧啶(U)會以胸腺嘧啶(T)被聚合酶識別並合成到新鏈上,但題目問的是「鹼性脫磺化後」的直接產物,並非 PCR 後產物,故非本題答案。 ([pubmed.ncbi.nlm.nih.gov](https:/
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