112年:(醫檢)生化(1)
使用酵素動力學反應並偶合脫氫酶,以波長 340 nm 吸光值測定 AST 酵素活性時,是偵測下列何者的吸光值變化?
Aaspartate
BATP
CNADH
Doxaloacetate
詳細解析
本題觀念:
AST (Aspartate aminotransferase) 催化 L-aspartate 與 α-ketoglutarate 生成 oxaloacetate 與 glutamate,若直接偵測產物氧化還原性不易,其後接上 malate dehydrogenase(MDH),將產生的 oxaloacetate 還原為 malate,同步氧化 NADH 為 NAD+,NADH 在 340 nm 波長有特徵吸收峰,即可透過其吸光值下降間接反應 AST 活性 (protocols.io)。NADH 的 340 nm 吸收峰歸因於 dihydronicotinamide 環,extinction coefficient 約 6200 M−1·cm−1,此波長 NAD+ 無吸收,故 340 nm 變化準確反映 NADH 濃度變化 (pmc.ncbi.nlm.nih.gov)。
選項分析
- 選項 A: aspartate
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