111年:(醫檢)檢驗(1)
承上題【下圖為以聚合酶連鎖反應檢測水泡液中腸病毒( enterovirus, EV )的電泳分析結果。關於此檢驗的結果判讀,下列何者最不適當?
】,檢體的檢測結果判讀何者正確?
A對照組 3的檢測是多餘的,不需要執行
B檢體 1是腸病毒陰性
C檢體 2及檢體 5是腸病毒陽性
D檢體 3是腸病毒陰性
詳細解析
本題觀念:
本題考查重點為聚合酶連鎖反應 (PCR) 之電泳結果判讀,特別是巢式 PCR (Nested PCR) 的應用與內部控制組 (Internal Control, IC) 的重要性。
- 巢式 PCR (Nested PCR):使用兩輪 PCR,第一輪使用廣效性引子 (Pan-enterovirus primers),第二輪使用特異性引子 (Specific primers)。這能提高檢測的靈敏度 (Sensitivity) (如檢體 3) 與特異性。
- 內部控制 (Internal Control, IC):用於監測 PCR 反應是否受到抑制或萃取是否成功。若檢體呈現陰性且無 IC 條帶,則為無效檢測 (Invalid);若檢體呈陰性但有 IC 條帶,則為真陰性。
影像分析:
請參照題目所附之電泳圖進行詳細解讀:
1. 第一輪 PCR (First Round PCR)
- 引子:PAN1/PAN2 (廣效腸病毒) + ICF/ICR (內部控制)。
- 條帶判讀:
- 347 bp:應為 腸病毒 (EV) 之 PCR產物(因為陽性對照組 C1 有此強條帶)。
- 196 bp:應為 **內部控制 (IC)
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