113年:醫學一(2)
若要將兩個質體上的去氧核糖核酸(DNA)片段進行重組,下列何種酵素最可能被使用?
A限制酶(restriction enzyme)
B核糖核酸聚合酶(RNA polymerase)
C反轉錄酶(reverse transcriptase)
D多核苷酸激酶(polynucleotide kinase)
詳細解析
本題觀念:
重組 DNA 技術 (Recombinant DNA Technology) 本題主要考查考生對於基因工程(Genetic Engineering)中常用酵素功能的理解,特別是如何對質體(Plasmid)進行操作以產生重組 DNA 分子。在將兩個不同的 DNA 片段(如兩個質體,或質體與外源基因)進行重組時,必須先將它們「剪開」並產生可互相配對的末端,才能進行後續的連接。
選項分析
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A. 限制酶(restriction enzyme):正確。
- 功能:限制酶(又稱限制性核酸內切酶,Restriction Endonuclease)是重組 DNA 技術中的「分子剪刀」。它能辨識 DNA 上特定的核苷酸序列(通常為迴文序列,palindromic sequence),並切斷 DNA 雙股螺旋的磷酸二酯鍵。
- 在重組中的角色:若要重組兩個質體或將片段插入質體,必須使用同一種(或產生相同末端的)限制酶切割兩個 DNA 分子。切割後會產生互補的「黏狀末端」(sticky ends)或「平整末端」(blunt ends),使兩個不同的 DNA 片段能夠透過鹼基配對結合,這是 DNA 重組的第一步且最關鍵的步驟。
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B. 核糖核酸聚合酶(RNA polymerase):**
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